现在鉴定亲子关系用得最多的是DNA分型鉴定。
待检物绝对不能混入其他杂质。
把样本细胞核中所含有DNA提取出来,然后进行一定的纯化,化除样本中的杂质。目前,最为常见的是通过血斑进行DNA鉴定,也就是说,要采集血样做鉴定。
DNA提取常用方法一般采用“直扩法”,也就是采用人类荧光标记STR复合扩增试剂盒(试剂盒里包含了DNA提取、扩增所需的试剂)进行PCR复合扩增。血斑用打孔器打出所需的样本大小,放入PCR反应管中,加入反应物缓冲液和引物混合体系,振荡摇匀。
PCR的中文名为聚合酶链式反应,简单的说,PCR扩增这一步就是把我们所需要的片段通过酶促反应,在PCR仪上进行大量复制,放大到通过某些专用仪器可以看到的程度。
这是最为费钱的一步,因为试剂盒是进口的,每次加入的试剂费用就要数百元。在进入加样区之前,实验人员先打开紫外线消毒灯,对整个房间进行消毒,确保加样房间没有任何的病菌及粉尘等,实验者也尽量不要说话。
试剂里边包括酶、引物等试剂,每个试管要加入0.2微升。加入试剂后,要将小试管放入小的混合器,让试剂和DNA样本充分混合。
这一步主要是上ABI测序仪检测的准备阶段,将双链的DNA打开,加一些检测用的的内标,主要是用来标记检测的片段长度。
为了能达到检测需求的量,要把小试管放入一个叫做扩增仪的仪器。把试管放入扩增仪后,里边的DNA提取物将不断繁殖、分裂。在一般情况下,经过2-3个小时的扩增,DNA提取物的量就能达到检测量。也就是说,要真正进行DNA检测、比对了。
主要是检测人员将所得结果进行分析汇总、计算,然后出鉴定结论和报告。
检测是在一个叫做遗传分析仪进行毛细管电泳和基因分型。这种设备非常先进,把扩增完的小试管放入仪器后,设备会自动从试管中提取DNA提取物,然后自动选择DNA位点,分析染色体。在一般情况下,设备会自动提取21个位点,然后,系统自动将需要做亲子鉴定的两个样本进行自动比对。
根据遗传学原理,如果所有的位点遗传信息都能匹配成功,我们也就能大概说,这对父子或者母子是亲子关系。当然,这只是最简单、最直观的看法,要判断孩子是否亲生,还要经过更加严谨的计算。
计算时,有个亲权指数(PI)计算,因为该公式类似于(p除以p+1)的模式,这个模式决定其结果不可能是整数。
因为世上没有绝对相同的DNA,因此最高只能算出99.99%以上的准确率。